Extracellular vesicles of Candida albicans show dual effects on Enterococcus faecalis growth and virulence: A laboratory-based investigation
白色念珠菌细胞外囊泡对粪肠球菌生长和毒力具有双重作用：一项实验室研究
来源：International Endodontic Journal 2025, Volume 58, Pages 613–626
《国际牙髓病学杂志》，2025年，第58卷，页码613–626
摘要
本研究探究白色念珠菌细胞外囊泡（EVs）对粪肠球菌生长及毒力的影响。分离鉴定白色念珠菌EVs，观察其对浮游态与生物膜态粪肠球菌的作用，检测其对粪肠球菌抗逆性、牙本质小管侵袭、牙胶尖生物膜形成及对巨噬细胞毒性与胞内存活的影响。结果显示EVs呈浓度依赖性双重调控：5 μg/mL EVs抑制粪肠球菌生长、生物膜形成、抗逆性、侵袭能力及细胞毒性；0.156 μg/mL EVs则发挥促进作用。表明白色念珠菌EVs参与真菌-细菌跨界通讯，高浓度EVs有望成为控制粪肠球菌的新型制剂。
关键词
白色念珠菌；细胞外囊泡；粪肠球菌；双重作用；生长；毒力；生物膜；跨界互作
研究目的
揭示白色念珠菌细胞外囊泡对粪肠球菌生长、生物膜形成、抗逆性及毒力的调控作用与浓度效应，阐明真菌-细菌跨界相互作用在根管治疗后疾病中的意义。
研究思路
分离纯化白色念珠菌EVs并进行形态、粒径、蛋白浓度表征；设置浓度梯度处理粪肠球菌，检测浮游生长、生物膜形成、耐次氯酸钠、耐饥饿碱性环境、牙本质小管侵袭、牙胶尖定殖、巨噬细胞侵袭与胞内存活等指标，明确不同浓度EVs的调控效应。
研究亮点
1 首次报道白色念珠菌EVs对粪肠球菌具有浓度依赖性双向调控作用。
2 系统揭示EVs影响粪肠球菌浮游生长、生物膜、抗逆性、侵袭力、胞内存活全链条毒力表型。
3 高浓度EVs可抑制粪肠球菌致病相关表型，具备根管抗感染应用潜力。
4 为牙髓感染中真菌-细菌跨界通讯提供新的实验依据。
可延伸的方向
1 解析EVs中发挥关键作用的活性成分（蛋白、脂质、核酸）。
2 探究EVs调控粪肠球菌基因表达与代谢通路的分子机制。
3 优化EVs制剂用于根管消毒与充填材料改性。
4 开展体内动物模型验证EVs的抗感染效果。
5 拓展至其他念珠菌与肠球菌的跨界互作研究。
测量的数据及研究意义
1 白色念珠菌EVs表征数据（图1），TEM、SEM显示双层膜囊泡结构，NTA测得峰值111.9 nm与230 nm，证明EVs成功分离。
2 粪肠球菌浮游生长曲线与CFU数据（图2），证实5 μg/mL EVs抑制、0.156 μg/mL EVs促进生长。
3 粪肠球菌生物膜SEM、CLSM、结晶紫与CFU数据（图3），证明EVs对生物膜呈双向调控。
4 粪肠球菌抗逆性数据（图4），5 μg/mL EVs降低对次氯酸钠与碱性环境的耐受。
5 牙本质小管侵袭SEM数据（图5a），高浓度EVs减少细菌侵入与定植。
6 牙胶尖生物膜CLSM与定量数据（图5b-d），EVs双向调控粪肠球菌在材料表面定殖。
7 巨噬细胞LDH细胞毒性数据（图6a），高浓度EVs降低粪肠球菌的细胞损伤。
8 巨噬细胞内外细菌CFU与胞内存活数据（图6b-d），EVs双向调控细菌侵袭与胞内持留。
结论
1 白色念珠菌EVs对粪肠球菌的生长、生物膜及毒力具有浓度依赖性双重作用。
2 5 μg/mL EVs可显著抑制粪肠球菌的增殖、生物膜形成、抗逆性、侵袭力及细胞毒性。
3 0.156 μg/mL EVs可促进粪肠球菌上述致病相关表型。
4 白色念珠菌EVs作为跨界信号分子参与牙髓感染微生态调控。
5 高浓度白色念珠菌EVs具有开发为新型抗粪肠球菌制剂的潜力。
使用芬兰Bioscreen仪器测量数据的研究意义
使用Bioscreen C Pro全自动生长分析仪连续24小时、每小时自动监测OD600，获得高精度、标准化的粪肠球菌生长动力学曲线；客观、定量区分不同浓度EVs对细菌生长的促进或抑制效应，精准确定双向作用的关键浓度阈值，为EVs双重调控作用提供可靠、可重复的核心表型证据。