摘要
木霉属是能产生重要工业代谢产物的真菌属之一。这些生物的生长是所用营养源以及培养它们的物理条件的结果。在这项工作中，使用自动化微生物生长曲线分析仪评估了不同营养源对从巴西圣保罗州Jureia-Itatins生态站土壤中分离的木霉菌菌株生长的影响。培养在含有不同碳源和氮源的液体培养基中进行，温度为28°C，pH 6.5，并以150 rpm振荡72小时。结果表明，正如预期的那样，在所研究的木霉菌菌株中，葡萄糖作为促进生长的碳源优于蔗糖，而酵母提取物和色胺酸是培养哈茨木霉和绿色木霉的良好促进生长氮源。
引言
总体而言，真菌拥有多样化的能力，构成了工业研究的基础。真菌被用于医学/制药工业，用于制造抗生素，例如产自产黄青霉的青霉素，以及由曲霉属和木霉属产生的酶，如淀粉酶、果胶酶和纤维素酶，也用于食品加工。
木霉菌菌株可以产生大量的代谢产物，如抗生素，降解复杂的底物，如纤维素、几丁质、木聚糖和木质素，并且还具有蛋白水解活性。由于这些特性，该属具有很高的生物技术潜力，并且存在于几乎所有生态系统中。为了提高对土壤微生物群生物多样性的认识，从巴西圣保罗的Juréia-Itatins生态站分离并鉴定了112种真菌物种。这些物种目前正在研究其生产医学和工业感兴趣的大分子的潜力。同一位作者确定，其中一些菌株能够产生酶，如木聚糖酶和包括γ-亚麻酸的脂肪酸，并观察到木霉物种可能在土壤养分循环中发挥重要作用。
与Bioscreen系统一样，比浊法已被用于微生物生长研究，提供以光密度单位表示的快速结果。该设备已用于微生物学的许多目的，包括基础研究，研究化学化合物对微生物生长的影响，用于质量控制，以及污染物降解测试。
考虑到了解影响真菌生长的因素以及木霉属生物技术潜力的重要性，选择了四个菌株，并从Juréia-Itatins生态站的土壤中分离出来，以便比较它们在存在碳源和氮源的浸没培养中的生长潜力，通过Bioscreen C全自动微生物生长曲线分析仪。
材料与方法
微生物
研究了四个菌株。这些菌株保存在MEA培养基中，在巴西圣保罗州立大学里奥克拉鲁环境研究中心的实验室中，温度为4°C。
通过从在25°C下生长7天的培养物制备这些菌株的接种物，孢子悬浮液浓度为每毫升10^6至10^7个孢子，悬浮于0.1%的Tween中。计数在含有0.85% NaCl的Neubauer计数室中进行。
培养
菌株在全自动生长曲线分析仪中培养，在GY培养基中，pH 6.5，含有2%的单一碳源，以及1%的单一氮源。相应地，测试了四种不同的培养物。Bioscreen板中的工作体积为每孔400微升，包括360微升每种培养基和40微升每种孢子溶液。温度控制在28°C，在540纳米处读取光密度。在72小时的时间内，每隔2小时自动读取细胞悬浮液的吸光度值，每次测量前，细胞培养物自动振荡60秒。所有实验均进行四次重复。对照管仅包含培养基。
Bioscreen C全自动生长曲线分析仪的光密度值使用电子表格软件进行分析，并计算每种培养基四次重复的平均值。这些平均值用于生成每种培养类型的生长曲线。
由于每个菌株的孢子溶液呈现不同的颜色，在时间零时，每个培养物的初始光密度值与对照培养物不同。这种颜色差异计算如下：
颜色影响 = 每种培养物的光密度 - 对照的光密度
接下来，从每种培养物0到72小时的所有光密度值中减去每种菌株特有的影响因子，以表达菌株的真实生长。对获得的数据应用方差分析，并通过事后检验进行确认，该检验用于验证菌株生长与对照以及菌株之间相比的显著性。实验结果根据生长时间分为四类。通过统计数据的三角测量与每个时期的光密度差异进行分析。
在不同培养条件下对单个菌株生长的分析
在排除颜色影响因子后，计算每个菌株的生长作为最终和初始平均光密度值之间的差值，考虑到每个平均光密度值来自重复实验。
通过比较单个菌株在每两种不同培养条件下的表现，以最小的光密度值为100%，最高的光密度值作为它们之间最高的相对生长率，获得每个菌株的相对生长，以百分比表示。
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