在医学的微观世界里,微生物样本如同暗藏疾病密码的钥匙,精准的样本采集是解锁健康奥秘的关键第一步。无论是血液、体液、组织还是分泌物,每一种样本都承载着人体健康与疾病的重要信息,它们的采集方法直接影响着后续检验结果的准确性,进而关系到临床诊断与治疗方案的制定。
接下来,我们将为你详细介绍医学中常见的各种微生物样本采集方法,这篇指南将为你打开一扇深入了解微生物样本采集的大门,助你在医学实践中更好地利用样本这把“钥匙”,为疾病的准确诊断和有效治疗提供有力支持。
人类口腔样本采集(DNA样本)
唾液
1)取样前1h,不要进食、饮水、饮酒、吸烟或嚼口香糖,建议晨起取样。
2)受试者需要至少在口腔中分泌收集唾液1min。打开无菌唾液采集器,采集未刺激流下的唾液。此过程需要重复多次采集到2-5mL唾液(不含泡沫部分)。马上置入-80°C冰箱保存。
舌背菌斑
1)采样前准备:取样前请受检者清水漱口,去除口中可能含有的食物残渣;
2)采样用无菌棉拭子(无菌生理盐水润湿),以增加微生物附着率。将无菌拭子伸进口腔,使拭子头部充分接触舌背,用适当的力度上下擦动,同时旋转拭子,让拭子头部充分接触舌背表面。采集2-3根拭子。
3)口腔拭子插入同一个无菌冻存管(或将棉拭子头部剪落入冻存管中),旋紧盖子,马上放入装有碎冰或冰袋的保温盒中,在最短时间(最长不超过4h)送至实验室进行DNA抽提或-80℃保存。
※注意:要求受试者在采样前用无菌水漱口3次(每次10mL)以去除食物残渣,使用无菌棉拭子从舌背中部擦拭3次(每根棉拭子/大约2cm长的擦拭动作)。
其他黏膜表面菌斑(如颊黏膜/上颚等)
1)采样前准备:取样前请受检者清水漱口,去除口中可能含有的食物残渣;
2)用无菌棉拭子(生理盐水湿润)擦取颊黏膜、上颚等部位表面的微生物,充分擦拭后将其放入无菌冻存管中,采集2-3根拭子,旋紧盖子,马上放入装有碎冰或冰袋的保温盒中,在短时间(最长不超过4h)送至实验室进行DNA抽提或-80℃保存。
※注意:
上颚采样:需要无菌棉拭子擦取整个坚硬的上颚约10s。
口腔粘膜采样:无菌棉拭子擦取左侧和右侧的整个口腔粘膜区,每侧约10s,不要接触到牙齿。
腭扁桃体采样:无菌棉拭子分别擦取左侧和右侧的腭扁桃体5s。
牙菌斑
1)取样部位:龈上牙菌斑(位于牙龈缘以上的牙面)、龈下牙菌斑(位于龈下,为牙龈所覆盖),两者处理方式相同,在获得龈下牙菌斑时需注意清楚残留的龈上牙菌斑。
2)取样前需要记录牙菌斑取自哪颗牙齿,如臼齿,前臼齿,门牙等(取样时注意丢弃出血样本)。
3)推荐使用环状无菌取样器或者无菌刮匙器,刮取尽量多的牙菌斑(无菌棉拭子反复擦拭),直接放入无菌冻存管中低温保存和运输。如果牙菌斑含量较少,可以用PBS将取样器上的牙菌斑洗下,将PBS一并放入无菌冻存管中(PBS的量不能超过6mL),置入-80℃冰箱保存。
※注意:角质化的牙龈采样:无菌棉拭子擦取颚前方的牙龈约10s。
龈沟液
1)龈下/黏膜下菌斑取样时,使用2mm×10mm滤纸条或02锥度35#吸潮纸尖,尖端切除0.5-1cm。滤纸条应使用无菌工具处理,取样前进行高压蒸汽灭菌并干燥。
2)持吸收纸尖或滤纸条,沿牙齿表面插入牙周袋,遇阻力坚持30s后,放入0.6mL无菌离心管中,接着放入冰盒或干冰桶中运输。
※注意:应将纸条或纸尖置于沟或袋的底部,以获得疾病进展前沿的菌斑。
咽喉
由于条件反射,这个部位非常难采集,若需要取,建议取完别的部位后再取,慢慢地将拭子放入咽部后方约5s。注意不要刮到扁桃体。
▲其他注意事项:
①了解测试者的口腔病史,记录相应信息。
②一周内使用过抗生素不建议采样。
③建议在早上未进食前或者餐后两小时后取样。
④采样前禁止吸烟,禁止使用牙膏、漱口水、口香糖等清洁口腔产品。
⑤确保实验数据准确性,采样时注意所使用耗材均为无菌产品。