2.4 LJK8菌株的初步鉴定


观察LJK8菌株的平板培养情况,(见图3),菌落为乳白色但不透明,圆形,边缘整齐。菌株经革兰氏染色后于显微镜下观察(见图4),细胞完全是细杆状,均为紫色,因此属于革兰氏阳性菌且无芽孢。

图3 LJK8菌株的菌落形态

图4 LJK8菌株的革兰氏染色图


2.5 LJK8菌株的生理生化试验


经过一系列的生理生化试验,观察结果,见表1。

表1生理生化试验结果


2.6 LJK8菌株的16S rDNA测定结果


将LJK8菌株的16S rDNA序列提交到GenBank数据库并构建菌株的系统发育树,见图5。可以初步鉴定LJK8菌株属于Rheinheimeraaquatica(水莱茵海默氏菌),扩增的16S rDNA与Rheinheimeraaquatica序列相似性达到99.99%,序列同源性为98%,所以初步确定该菌株为Rheinheimeraaquatica。


LJK8菌株的16S rDNA序列:


CGTAGGAAGCTACCCGATAGAGGGGGATACCAGTTGGAAACGACTGTTAATACCGCATAATGTCTACGGACCAAAGTGTGGGACCTTCGGGCCACATGCTATCGGATGCGCCTACGTGGGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCAACGATCCCTAGCTGGTTTGAGAGGATGATCAGCCACACTGGAACTGAGACACGGTCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGCAAGCCTGATCCAGCCATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGCCTTCGGGTTGTAAAGCACTTTCAGTTGGGAGGAAGGGTTGTGTGTTAATAGTACACAGCCTTGACGTTACCAACAGAAGAAGCACCGGCTAACTCTGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACAGAGGGTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGAAGCGCACGTAGGCGGTTTTTTAAGTCAGATGTGAAAGCCCCGGGCTCAACCTGGGAATTGCATTTGAAACTGGAAAACTAGAGTGTGTGAGAGGGGGGTAGAATTCCAAGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATTTGGAGGAATACCAGTGGCGAAGGCGGCCCCCTGGCACAACACTGACGCTCAGGTGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGTCTACTAGCTGTTCGTGACCTTGTGTCGTGAGTAGCGCAGCTAACGCACTAAGTAGACCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGATTAAAACTCAAATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGACGCAACGCGAAGAACCTTACCTACTCTTGACATCCAGAGAAGACTGCAGAGATGCGGTTGTGCCTTCGGGAACTCTGAGACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTTGTGAAATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATCCTTAGTTGCCAGCGCGTAATGGCGGGAACTCTAGGGAGACTGCCGGTGATAAACCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGGCCCTTACGAGTAGGGCTACACACGTGCTACAATGGTATGTACAGAGGGAGGCAAGCTGGCGACAGTGAGCGGATCTCTTAAAGCATATCGTAGTCCGGATCGCAGTCTGCAACTCGACTGCGTGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCAAATCAGAATGTTGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTGGGTTGCAAAAGAAGTAGGTAGCTTAACCTTCGGGAGGGCGCTTACCACTTTGTGATTCATGACTGGGGTGAAGTCGTAA。

图5 LJK8的16S rDNA序列比对结果


3讨论


从盐含量高的泡菜为原料,以硫酸铵为唯一氮源的筛选培养基,筛选出具有氨氮降解能力的微生物,再进行分离和纯化,筛选出1株对高氨氮含量水相具有较高降解效率的菌株LJK8。经过测定,LJK8的最大波长及生长曲线、革兰氏染色及对其进行的一系列生理生化试验,可以初步了解LJK8菌株的基本属性。LJK8菌株的最适吸收波长在380 nm处,由其生长曲线可以看出,LJK8菌株在培养14 h时达到最大生长量;当以氨氮初始含量为500 mg/L的培养基培养时,并测定其氨氮降解率,在24~72 h内的降解效率达到64.85%,通过对LJK8菌株生长量及氨氮含量变化的检测,表明菌株生长与降解氨氮是同步进行的,说明其可在较长时间内发挥降解作用。


目前对能处理水体或者土壤中氨氮的文献报道还比较少,而我们研究从泡菜中筛选出来的高效氨氮降解菌LJK8菌株属于Rheinheimeraaquatica(水莱茵海默氏菌),还未见该菌用于氨氮降解的报道,LJK8如果应用于水体污染的处理方面还有很大的发展潜力,因此可对其在养殖污水、工业污水或者土壤中氨氮的深度净化处理上的应用再进一步进行研究。不过筛选出来的LJK8菌株相对于同一时段筛选的其他菌株的氨氮降解效率虽然较高,但是在如此高浓度的氨氮条件下仍然还有相当量的氨氮残留,因此我们后期将会研究该菌的降解工艺,并对其降解条件进行优化,增强菌株对高浓度氨氮污水的净化能力。期望LJK8能在后期的养殖污水及水体污染处理方面发挥一定的作用。


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