黄瓜白粉病是一种传播速度快、侵入期和潜伏期短、发生频率高的蔬菜病害,一旦暴发将对黄瓜的品质和产量造成严重的打击。生物防治因其低毒性、无残留、不易产生抗药性等特性在病害防治方面更具优势。生物防治途径的挖掘开发离不开对生防微生物的研究和应用。在芽孢杆菌属的细菌是被探索和开发最多的植物病害生防细菌之一,作为一类植物根际促生细菌,在促生、防病等方面发挥重要作用。本研究从植物根际土壤中筛选得到对黄瓜白粉病具有防治效果的枯草芽孢杆菌S1,并验证了其防病促生作用,为菌株的开发利用奠定了基础。


摘要


【背景】黄瓜白粉病作为黄瓜种植过程中常见的真菌病害之一,在世界范围内广泛发生,造成黄瓜品质和产量下降,引起严重的经济损失。


【目的】分离鉴定对黄瓜白粉病具有防治效果的原始生防细菌菌株,验证其防病促生作用。


【方法】利用平板筛选法分离拮抗菌,并结合使用16S rRNA基因序列分析、系统发育分析、全基因组测序、次生代谢物预测及形态特征分析等方法鉴定该菌株对黄瓜白粉病的生防效果以及对黄瓜植株生长的促进作用。

图1发酵液处理后5 d的玉米小斑病菌苔

图2枯草芽孢杆菌S1细菌形态[透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM),30 000×]

图3菌株S1的生长曲线

图4拮抗菌发酵液对玉米小斑病菌分生孢子萌发的抑制(400×)A–C分别为菌株S1、短小芽孢杆菌103925发酵液处理和空白对照组的第2 h玉米小斑病菌分生孢子萌发情况.D–F分别为菌株S1、短小芽孢杆菌103925发酵液处理和空白对照组的第4 h玉米小斑病菌分生孢子萌发情况.G–I分别为菌株S1、短小芽孢杆菌103925发酵液处理和空白对照组的第6 h玉米小斑病菌分生孢子萌发情况


【结果】利用玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)作为指示菌,平板筛选得到拮抗细菌S1,并验证该菌对盆栽种植黄瓜植株的促生作用以及对白粉病的防治效果。16S rRNA基因序列分析结果表明该菌株与Bacillus subtilis KZH-E3具有100%的相似性。通过全基因组测序,借助生物信息学分析工具,利用系统发育进化关系,在全基因组水平上菌株S1被鉴定为枯草芽孢杆菌,自主命名为Bacillus subtilis S1。通过温室盆栽防效试验,证明菌株S1对黄瓜白粉病具有显著的防效。


【结论】枯草芽孢杆菌S1对黄瓜幼苗具有明显的防病促生作用,具有重要的研究意义。

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