可降胆固醇的犬源植物乳杆菌分离与鉴定、生长曲线、益生性和安全性研究（四）-上海谓载科技有限公司

可降胆固醇的犬源植物乳杆菌分离与鉴定、生长曲线、益生性和安全性研究（四）

来源：动物营养学报发布时间:2026-03-02 14:42:38 浏览：34 次

3.3.4 CLP51的耐受性

如表4所示，与正常培养条件37℃相比，CLP51经过60℃高温处理后其存活率为82.29%，即活菌数仍可以达到1.35×108 CFU/mL，具有较好的耐高温能力。

CLP51接种于pH=4的PBS 3 h后，存活率为105.81%，显著高于pH=2和pH=3时（P<0.05）。CLP51接种于pH=3的PBS 3 h后，存活率为99.30%，显著高于pH=2时（P<0.05）。

CLP51在0.1%、0.3%和0.5%胆盐中的存活率分别为102.77%、93.99%和93.30%，在0.1%胆盐中的存活率显著高于0.3%和0.5%胆盐中（P<0.05）。

CLP51在人工胃液、肠液和胃肠液中的存活率分别为41.63%、100.21%和46.19%，即活菌数分别为1.69×106、2.60×1010和5.31×106 CFU/mL，在人工肠液中的存活率显著高于人工胃液和胃肠液中（P<0.05）。

表4 CLP51的耐受性

项目 Items	存活率 Survival rate	P值 P-value
50℃, 3 min	102.02±1.32^a	<0.001
60℃, 3 min	82.29±0.60^b	<0.001
pH=2	0^c	<0.001
pH=3	99.30±0.28^b
pH=4	105.81±3.26^a
0.1%胆盐 0.1% bile salt	102.77±5.32^a	0.019
0.3%胆盐 0.3% bile salt	93.99±0.52^b
0.5%胆盐 0.5% bile salt	93.30±1.34^b
人工胃液 Artificial gastric juice	41.63±1.53^b	<0.001
人工肠液 Artificial intestinal juice	100.21±1.29^a
人工胃肠液 Artificial gastrointestinal fluid	46.19±7.18^b

3.3.5 CLP51的表面疏水率和自凝聚率

如表5所示，CLP51在二甲苯:氯仿=1:1的混合液中表面疏水率显著高于在二甲苯和氯仿中（P<0.05），在二甲苯、氯仿中的表面疏水率无显著差异（P>0.05），均属于高度疏水。

CLP51在16和24 h的自凝聚率显著高于在8 h（P<0.05），在8、16和24 h的自凝聚率分别为81.57%、94.63%和95.53%，说明CLP51具有良好的自凝聚性。

表5 CLP51表面疏水率和自凝聚率结果

项目 Item	表面疏水率 Surface hydrophobicity rate				自凝聚率 Self-coagulation rate
	二甲苯 Xylene	氯仿 Chloroform	二甲苯:氯仿=1:1 Xylene:chloroform=1:1	P值 P-value	8 h	16 h	24 h	P值 P-value
	二甲苯 Xylene	氯仿 Chloroform	二甲苯:氯仿=1:1 Xylene:chloroform=1:1	P值 P-value	8 h	16 h	24 h	P值 P-value
犬源植物乳杆菌51 CLP51	65.06±1.98^b	62.08±3.77^b	79.84±1.39^a	<0.001	81.57±3.94^b	94.63±1.15^a	95.53±0.35^a	0.001

3.3.6 CLP51的抑菌活性

如图4所示，CLP51的菌悬液和无细胞上清液能够有效抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌和单核细胞增生李斯特菌的生长增殖，而CLP51的菌体沉淀无抑菌作用。

图4 CLP51的抑菌活性

A:大肠杆菌;B:金黄色葡萄球菌;C:沙门氏菌;D:铜绿假单胞菌;E:单核细胞增生李斯特菌;a:菌悬液;b:无细胞上清液;c:菌体沉淀;d:MRS肉汤。

如表6所示，CLP51的无细胞上清液的抑菌效果为：单核细胞增生李斯特菌 > 大肠杆菌 > 铜绿假单胞菌 > 沙门氏菌 > 金黄色葡萄球菌，CLP51的菌悬液的抑菌效果为：单核细胞增生李斯特菌 > 铜绿假单胞菌 > 大肠杆菌 > 沙门氏菌 > 金黄色葡萄球菌。

表6 CLP51的抑菌试验结果

项目 Items	抑菌圈直径 Diameter of inhibition zone
项目 Items	无细胞上清液 Cell-free supernatant	菌悬液 Bacterial suspension
大肠杆菌 Escherichia coli	19.85±0.79^b	20.79±1.78^bc
金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus	14.88±0.72^d	16.03±0.67^d
沙门氏菌 Salmonella	17.48±0.30^c	17.78±0.21^cd
铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa	19.74±1.15^b	21.78±2.72^ab
单核细胞增生李斯特菌 Listeria monocytogenes	23.14±0.76^a	24.91±2.19^a
P值 P-value	0.001	<0.001

3.3.7 CLP51的抗生素敏感性

药敏片直径为6 mm，设抑菌圈（透明圈）直径大于7 mm的为具有抑菌性，小于等于7 mm视为无抑菌性。如表7所示，CLP51对克林霉素敏感性强，对氯霉素、亚胺培南、头孢唑林和氟苯尼考等中度敏感，对阿奇霉素、林可霉素、庆大霉素等低度敏感，对万古霉素、多黏菌素B等不敏感。

表7 CLP51抗生素敏感性

抗生素 Antibiotics	浓度 Concentrations/ (μg/片)	结果 Results	抗生素 Antibiotics	浓度 Concentrations/ (μg/片)	结果 Results
青霉素 PEN	10	—	阿米卡星 AMK	30	+
苯唑西林 OX	1	—	庆大霉素 GEN	10	+
氨苄西林 AMP	10	—	卡那霉素 KAN	30	—
哌拉西林 PIP	100	—	链霉素 S	10	—
头孢氨苄 CN	30	—	四环素 TET	30	—
头孢唑林 CZ	30	++	米诺环素 MI	30	—
头孢呋辛 CXM	30	—	红霉素 E	15	++
头孢他啶 CAZ	30	—	阿奇霉素 AZI	15	+
头孢曲松 CRT	30	+	诺氟沙星 NOR	10	—
头孢哌酮 CPZ	75	+	环丙沙星 CIP	5	—
林可霉素 MY	2	+	克林霉素 CC	2	+++
万古霉素 VAN	30	—	左氧氟沙星 LEV	5	+
多黏菌素B PB	300	—	亚胺培南 IPM	10	++
复方新诺明 SXT	25	++	强力霉素 DO	30	+
氯霉素 C	30	++	氟苯尼考 FFC	30	++

透明圈直径（mm）：+++代表23～30 mm；++代表15～22 mm；+代表7～14 mm；—代表没有抑菌圈。

3.4 CLP51的安全性评价

3.4.1 溶血试验

如图5-A所示，阳性对照的金黄色葡萄球菌表现出β-溶血；如图5-B所示，CLP51表现为γ-溶血（无溶血环），可初步判断CLP51安全，无溶血性。

图5 金黄色葡萄球菌和CLP51的溶血试验

3.4.2 小鼠安全性试验

3.4.2.1 CLP51对小鼠生长性能的影响

试验期间未有小鼠死亡，临床观察所有小鼠精神状况良好，摄食、饮水、粪便形态均正常。试验结束后剖检观察其内脏色泽、质地、体积等均未见病变，说明CLP51对小鼠临床应用无毒副作用。如图6所示，各组之间小鼠体重、平均日增重和平均日采食量均无显著差异（P>0.05）。

图6 CLP51对小鼠生长性能的影响

3.4.2.2 CLP51对小鼠器官指数的影响

如表8所示，各组之间小鼠各器官指数均无显著差异（P>0.05）。

表8 CLP51对小鼠器官指数的影响