3 结果与分析

3.1 植物乳杆菌分离鉴定结果

经形态学观察、显微镜检，结合16S rRNA测序比对，鉴定出4株植物乳杆菌，分别命名为CLP16、CLP51、CLP115和CLP121，4株植物乳杆菌的系统进化树如图1所示。

图1 4株植物乳杆菌的系统进化树

CLP16：犬源植物乳杆菌16 canine-derived Lactobacillus plantarum 16；CLP51：犬源植物乳杆菌51 canine-derived Lactobacillus plantarum 51；CLP115：犬源植物乳杆菌115 canine-derived Lactobacillus plantarum 115；CLP121：犬源植物乳杆菌121 canine-derived Lactobacillus plantarum 121； Lactobacillus plantarum Sourdough K12：植物乳杆菌酸面团K12；Lactobacillus plantarum 3579：植物乳杆菌 3579；Lactobacillus plantarum 5594：植物乳杆菌 5594；Lactobacillus garii Flll369：加里乳杆菌Fl11369。

3.2 菌株筛选结果

对4株植物乳杆菌进行胆盐解离能力和体外降胆固醇能力测定，结果如图2和表1所示。CLP16、CLP51、CLP115、CLP121周围都有沉淀圈产生，表明4株植物乳杆菌均具有胆盐解离能力。CLP51在4 h时胆固醇去除率显著高于CLP16、CLP115、CLP121（P<0.05）。因此，最终选择胆固醇去除率最优的CLP51进行后续益生特性研究。

图2 4株植物乳杆菌的胆盐解离能力

表1 4株植物乳杆菌的胆固醇去除率

项目 Items	菌株 Strains				P值 P-value
	CLP16	CLP51	CLP115	CLP121
4 h	9.70±4.12b	17.94±3.04a	10.34±1.36b	3.01±0.65c	<0.001
8 h	20.99±4.87	25.50±8.38	19.42±1.90	19.71±3.82	0.375
12 h	21.57±2.93	23.99±4.05	20.54±1.11	15.53±8.26	0.148
16 h	19.06±3.90	23.09±7.25	22.58±3.21	21.80±3.96	0.658
24 h	18.16±6.94	24.34±5.77	18.06±4.77	14.56±1.85	0.113

同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P<0.05），相同或无字母表示差异不显著（P>0.05）。表5、表8、表9同。

3.3 生长及益生特性结果

3.3.1 生理生化特性

如表2所示，CLP51可利用葡萄糖等单糖，蔗糖、麦芽糖、乳糖等双糖，具有运动性，尿素试验呈阳性。

表2 CLP51生理生化特性

项目 Items	结果 Results	项目 Items	结果 Results
葡萄糖 Glucose	+	菊糖 Inulin	+
乳糖 Lactose	+	棉子糖 Raffinose	—
纤维二糖 Cellobiose	+	硫化氢试验 Hydrogen sulfide test	+
麦芽糖 Maltose	+	山梨醇 Sorbitol	+
蔗糖 Sucrose	+	七叶苷 Aesculin	+
甘露醇 Mannitol	+	运动性 Motility	+
水杨苷 Salicin	+	吲哚试验 Indole test	—
触酶试验 Catalase test	—	氧化酶试验 Oxidase test	—
硝酸盐还原试验 Nitrate reduction test	—	明胶液化试验 Gelatin liquefaction test	—
果糖 Fructose	+	尿素试验 Urease test	+
甘露糖 Mannose	+	枸橼酸盐试验 Citrate test	—

+：阳性反应 positive reaction；—：阴性反应 negative reaction。

3.3.2 生长及产酸能力

如图3所示，生长曲线表明，CLP51在0～3 h处于生长迟缓期，3～15 h处于生长对数期，15 h后进入生长稳定期。产酸曲线表明，pH在3 h内缓慢下降，3 h后下降速率加快，18 h后趋于平缓，稳定在3.9左右。

图3 CLP51的生长曲线和产酸曲线

3.3.3 自由基清除能力

如表3所示，CLP51对ABTS、DPPH自由基的清除率显著高于对超氧阴离子自由基的清除率（P<0.05）。

表3 CLP51的自由基清除率

项目 Items	自由基清除率 Free radical scavenging rate
2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐 ABTS	85.43±8.20a
1,1-二苯基-2-三硝基苯肼 DPPH	94.03±1.91a
超氧阴离子 Superoxide anion	67.83±6.04b
P值 P-value	0.005

同列数据肩标不同小写字母表示差异显著（P<0.05），相同或无字母表示差异不显著（P>0.05）。表4、表6同。

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