2结果
2.1胰岛素对病原线虫卡森斯氏线虫0657L共生细菌伯氏致病杆菌0657L菌落直径的影响
1∶500和1∶5 000浓度胰岛素处理0～1 d时伯氏致病杆菌0657L生长较慢，所有单菌落均未长出;2～6 d时，与空白对照组(CK)相比，1∶500和1∶5 000浓度胰岛素处理组伯氏致病杆菌0657L菌落直径显著增大(P<0.05)，且低浓度(1∶5 000)胰岛素处理组菌落直径与高浓度(1∶500)浓度胰岛素处理组相比促进作用更明显，但二者之间没有显著差异(P>0.05)。在整个观察时间段内，除1 d时各处理组未生长外，2～6 d时，1∶5 000浓度胰岛素下，菌落直径分别为2.89，3.68，4.06，4.52和4.85 mm，较空白对照组分别增大77.2%，27.6%，19.8%，19.5%和17.6%;与空白对照组相比，1∶500浓度胰岛素处理组菌落直径分别增大54.0%，20.1%，14.2%，15.1%和14.9%(图1，2)。
图1 1∶500和1∶5 000浓度胰岛素下伯氏致病杆菌0657L培养3 d时的单菌落形态
图2 1∶500和1∶5 000浓度胰岛素下伯氏致病杆菌0657L菌落直径
图3 1∶500和1∶5 000浓度胰岛素下伯氏致病杆菌0657L生长速率
2.2胰岛素对伯氏致病杆菌0657L生长速率的影响
根据伯氏致病杆菌0657L的生长速率绘制曲线图(图3)，伯氏致病杆菌0657L的生长速率在整个实验周期内呈现由快至慢的趋势，符合逻辑斯蒂生长曲线。1～2 d时，由于菌落生长缓慢，显微镜下观察不到明显菌落，即为延缓期;2～3 d时，菌落快速生长，即为对数生长期，共生细菌生长速度最快;1∶500和1∶5 000胰岛素处理组共生细菌生长速率较空白对照组(CK)和林格氏液组显著(P<0.05)加快，分别由空白对照组的68.0μm/d提高至104.7和120.4μm/d。1∶500胰岛素处理组较空白对照组和林格氏液组分别加快36.7和30.6μm/d，1∶5 000浓度下，较空白对照组和林格氏液组分别加快52.5和46.4μm/d，但高浓度(1∶500)处理组与低浓度(1∶5 000)处理组之间无显著差异(P>0.05)。3～7 d时，菌落的生长速率明显变慢，后逐渐趋于平稳，即为稳定期。
2.3胰岛素对卡森斯氏线虫0657L寿命的影响
结果表明(图4)，取食不同浓度胰岛素处理的伯氏致病杆菌0657L可以延长自然状态下卡森斯氏线虫0657L寿命。与空白对照组(CK)相比，取食1∶5 000胰岛素处理的伯氏致病杆菌0657L后卡森斯氏线虫0657L的平均寿命由11.0 d延长至14.0 d，延长了27.3%，1∶500浓度胰岛素处理组较1∶5 000处理组的效果更好，卡森斯氏线虫0657L平均寿命为16.0 d，延长了45.5%。综上所述，不同浓度胰岛素均可以延长卡森斯氏线虫0657L寿命，但两处理浓度胰岛素处理组之间差异不显著(P>0.05)。
图4取食1∶500和1∶5 000浓度胰岛素处理48 h时的伯氏致病杆菌0657L后卡森斯氏线虫0657L的寿命
2.4胰岛素对卡森斯氏线虫0657L运动能力的影响
结果如图5所示，与空白对照组(CK)相比，卡森斯氏线虫0657L在3龄幼虫期(胰岛素处理3 d时)，胰岛素的补充可显著加快卡森斯氏线虫0657L的每30 s头部摆动次数，取食1∶5 000和1∶500胰岛素处理的伯氏致病杆菌0657L后卡森斯氏线虫0657L头部摆动频率由28.4次/30 s分别加快到44.4次/30 s和49.6次/30 s，分别显著提高了56.3%和74.7%(P<0.05)。卡森斯氏线虫0657L在4龄幼虫期(胰岛素处理7 d时)，与空白对照组相比，取食高浓度(1∶500)胰岛素处理的伯氏致病杆菌0657L后卡森斯氏线虫0657L头部摆动频率为57.2次/30 s，显著提高了47.4%(P<0.05);而取食低浓度(1∶5 000)胰岛素处理的伯氏致病杆菌0657L后卡森斯氏线虫0657L头部摆动频率无显著差异(P>0.05)。而在卡森斯氏线虫0657L生命的后期成虫期(胰岛素处理11 d时)，运动能力较3龄幼虫略强，较4龄幼虫期略弱，但与空白对照组相比，不同浓度的胰岛素加入对线虫的运动能力均有所提高，但并无显著差异(P>0.05)。综上所述，胰岛素的补充有助于卡森斯氏线虫0657L抵御运动能力的衰退，且不同浓度处理组的效果也不同，高浓度对线虫运动能力衰退的延缓作用更强。
图5取食1∶500和1∶5 000浓度胰岛素处理48 h时的伯氏致病杆菌0657L后卡森斯氏线虫0657L的每30 s头部摆动次数
2.5胰岛素对卡森斯氏线虫0657L吞咽能力的影响
结果显示(图6)，胰岛素的补充在卡森斯氏线虫0657L 3龄幼虫期(胰岛素处理3 d时)、4龄幼虫期(胰岛素处理7 d时)和成虫期(胰岛素处理11 d时)均可显著提高卡森斯氏线虫0657L的吞咽能力。与空白对照组(CK)相比，3龄幼虫期时，取食1∶5 000和1∶500胰岛素处理的伯氏致病杆菌0657L后，卡森斯氏线虫0657L吞咽频率由11.0次/30 s分别提高到16.6次/30 s和18.2次/30 s，分别显著提高了50.9%和65.5%(P<0.05);4龄幼虫期时吞咽频率由14.2次/30 s分别提高到18.0次/30 s和19.2次/30 s，分别显著提高了26.8%和35.2%(P<0.05);11 d时吞咽频率由11.8次/30 s分别提高到14.6次/30 s和15.0次/30 s，分别显著提高了23.7%和21.1%(P<0.05)。而且同运动能力一样，成虫期较3龄幼虫期略强，较4龄幼虫期略弱。综上所述，胰岛素能够提高卡森斯氏线虫0657L吞咽频率，且不同浓度处理组促进作用略有差异，高浓度较低浓度对吞咽能力的促进作用更明显。
图6取食1∶500和1∶5 000浓度胰岛素处理48 h时的伯氏致病杆菌0657L后卡森斯氏线虫0657L的每30 s吞咽次数
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