一 原厂密封硬盖板基础结构以及通气原理
1. 配件基础介绍
Bioscreen蜂窝板原厂配套硬盖板分为密闭密封硬盖板、带透气滤膜透气盖板两类，硬盖板可以卡在深井蜂窝板上端；密闭盖板可以实现微孔完全隔绝外界空气，透气盖板带有0.22 μm除菌透气滤膜，能够完成气体交换，阻隔外界杂菌落入培养液内部。仪器腔体内部还搭载整体舱体密封热盖，蜂窝板盖板负责独立管控每一块微孔板氧气环境，腔体热盖管控腔内温湿度、抑制冷凝起雾。
2. 氧气环境适配逻辑
好氧微生物生长需要持续和外界开展氧气交换，选用透气盖板就能够让氧气穿过滤膜进入微孔；专性厌氧菌不能接触氧气，密闭硬盖板封堵所有微孔上方通气口，阻断氧气流通，配合腔体厌氧气体模组置换舱内空气，搭建无氧孵育环境；微‑好氧菌、兼性厌氧菌，可以按需选用透气盖板或者半密封的处理方式。
二 好氧菌‑透气盖板完整标准操作流程
1. 前期耗材与样品准备
提前灭菌蜂窝深井板、原厂透气硬盖板；在超净工作台完成菌种接种，各个微孔添加200‑250 μL灭菌培养基以及菌液，外圈微孔装入无菌纯水充当蒸发缓冲孔，降低长时间孵育的液体损耗。
2. 透气盖板封板操作
在无菌环境拿起透气硬盖板，对准蜂窝板卡槽垂直按压卡紧，确认盖板全部卡扣咬合牢固，透气滤膜位置没有被手指、培养液污染，滤膜通气口保持通畅，不要被培养基污渍堵住。
透气滤膜可以实现氧气自由流通，同时阻挡环境当中细菌、真菌落到微孔培养液造成杂菌污染。
3. 蜂窝板安放以及仪器参数调试
将封盖结束的蜂窝板放置在托盘卡位，缺口朝向仪器左前方，保证板材底部和加热托盘充分贴合；关闭仪器外层孵育舱热盖。
设置对应菌种孵育温度，开启间歇振荡，每次读数之前振荡60‑120 s，静置30 s消除微孔气泡；检测通道优先根据培养基是否有色选择600nm单波长或者宽波段浊度通道，设置扫描间隔。
4. 有氧培养过程管控
腔体舱门日常保持关闭，腔体不需要通入无氧混合气；透气盖板滤膜定期检查，长时间多日培养留意滤膜有没有被水汽浸湿，浸湿之后会堵塞通气通道，造成微孔内部氧气不足。
如果开展需要二氧化碳环境的好氧微生物培养，可以开启仪器气路通入对应浓度二氧化碳，透气盖板可以顺利完成气体交换。
三 厌氧菌‑密闭式硬盖板全套实操步骤
1. 厌氧环境前置准备工作
所有接种操作在厌氧工作站内部完成，规避接种阶段菌体接触氧气；准备经过高压灭菌的原厂全密封硬盖板、厌氧指示剂，培养基提前除氧静置。
2. 微孔加样以及密封封板
厌氧工作站内往深井微孔添加除氧后的培养基与厌氧菌菌液，液面高度维持200‑250 μL；直接扣上密闭硬盖板，按压至卡扣完全锁紧，做到微孔上端没有通气缝隙。
部分严苛厌氧实验，可以在培养液表层添加一层无菌矿物油，二次隔绝氧气渗入微孔。
3. 蜂窝板装入腔体、腔体气体置换
将已经密封完毕的蜂窝板安放至仪器托盘，关闭孵育舱舱门；启动厌氧气体控制模块，采用氮气多次吹扫置换腔体内部空气，多次循环之后通入厌氧混合工作气体。
放置厌氧指示孔，依靠亚甲基蓝指示剂颜色，判断腔体内部氧气是否清除干净，指示剂维持无色即代表厌氧环境达标。
4. 仪器运行参数设置
设置厌氧菌适宜孵育温度，调低振荡转速，剧烈震荡会加快盖板缝隙微量氧气溶解进培养液；开启光学检测通道，设定生长曲线扫描周期。
全程保证舱门紧闭，不要中途开启舱体，防止外界空气进入腔体破坏无氧环境；密闭硬盖板隔绝微孔和腔体气体之外的外界空气，维持微孔内部无氧条件。
四 兼性厌氧菌、微需氧菌盖板选用方案
1. 兼性厌氧菌
常规有氧条件选用透气盖板；需要无氧对照组的时候更换密闭硬盖板，腔体通入无氧气体，设置有氧、无氧两组对照蜂窝板。
2. 微需氧微生物
优先选用透气盖板，腔体通入低氧混合气，依靠腔体整体气体环境控制氧气浓度，盖板维持气体流通。
五 日常维护和实操关键注意事项
1. 硬盖板属于可反复使用耗材，每次实验结束之后拆开盖板，清洗、高压灭菌之后存放；透气盖板的除菌滤膜出现破损、受潮堵塞之后需要及时更换全新滤膜配件。
2. 盖板卡扣务必卡合到位，盖板松动会引发水汽快速蒸发、杂菌污染、厌氧环境失效。
3. 不可以使用普通封口膜替代原厂硬盖板，普通封口膜容易阻碍光路、产生褶皱，干扰浊度检测读数，还极易出现气体渗透。
4. 做对照实验的时候，实验组、对照组盖板类型保持统一，不可一块板透气盖板、一块板密闭盖板，带来氧气条件的系统误差。