1. 基线扣零方法
利用全程同步空白对照孔(仅培养基无菌种)的时序OD数据进行基线校正。以实验初始平稳基线数值为基准,将所有样品孔OD数值逐时减去空白孔基线读数,消除冷凝漂移、培养基底色、光路基线偏移带来的整体偏移误差。
可在Bio-link软件或Origin等第三方软件执行基线校正,以实验起始稳定阶段做零点校准,保证初始OD数值统一归零,消除整体基线漂移,保留真实菌体浊度变化信号。
2. 平滑降噪方法
原始OD曲线常含有光路噪声、振荡扫描抖动带来的高频毛刺,可采用移动平均滤波(滑动均值)方法做平滑处理,选取合适窗口点数匹配读数间隔,不破坏真实生长拐点和动力学趋势;也可采用低通滤波方法去除高频噪声。
禁止过度平滑,避免篡改真实延滞期拐点和比生长速率细节;仅消除随机噪声,保留真实生长动力学变化曲线。
3. 异常孔剔除方法
第一步:定位异常孔,对照原始曲线查看持续异常漂移、读数突变、气泡干扰、污染或沉降严重的孔,结合平行孔重复性判断离群数据。
第二步:设置筛选规则,剔除偏离整体平行组显著的离群孔,可参照重复对照孔变异系数,标记并屏蔽整孔时序数据,而非随意修改单一点位数值,保留其余有效孔完整原始时序数据。
第三步:做好记录,标注剔除原因与孔位信息,保证数据处理可追溯,不可随意删除正常数据;优先在原始数据集做标记,保留原始数据备份。
