1. 空白对照正确设置方法

采用培养基空白对照:和实验组使用完全一致的基础培养基、药物浓度、pH、琼脂含量、封板方式、体积以及培养环境,仅不添加菌种菌液,其余条件全程保持相同,放在同一块蜂窝板内同步孵育扫描,全程和样品一起读数监测基线漂移。

可设置多组重复空白孔,减少单孔误差,用于后续逐点基线校正,消除培养基本身浊度、蒸发浓缩、冷凝水、药物底色造成的OD基线偏移。


2. 不推荐直接用无菌水空白

无菌水和实际培养基体系差异极大:渗透压、成分、浊度、蒸发速率、pH均不一致,无法真实反映培养基底色漂移,校正后会产生系统性读数误差,不能匹配真实样品体系。仅可用于仪器纯光路校准,不可作为长期生长动力学基线对照。


3. 区分两类用途

基线校正对照:培养基空白对照(同配方、同处理、无菌种),用于校正实验整体基线漂移

仪器光路校准:可使用纯水/空板做仪器基础光路校准,不等于实验动力学空白对照

数据分析:以同板培养基空白的时序OD数据对样品OD进行逐点校正,得到真实菌体浊度变化