摘要
本研究测定了24株II组肉毒梭菌菌株的最低和最高生长温度，以及在10°C、30°C、37°C和40°C下的最大生长速率。通过扩增片段长度多态性分析揭示了菌株的遗传多样性。最低生长温度范围为6.2°C至8.6°C，最高生长温度范围为34.7°C至39.9°C。E型菌株在37°C时的平均最高生长温度和平均最大生长速率显著高于B型和F型菌株。发现所有菌株在37°C的最大生长速率与最高生长温度之间存在显著相关性。一些具有较高最低生长温度的E型菌株在37°C的最大生长速率也高于30°C，这表明一些II组肉毒梭菌菌株在生长特性上比其他菌株更偏向嗜温生长。我们发现AFLP聚类之间的差异相对较小，表明菌株间多样的遗传背景并未反映在生长特性上。II组肉毒梭菌以及一些具有嗜温生长特性的E型菌株的生长特性可能对接种研究和预测模型以评估食品安全性产生影响。
肉毒梭菌菌株可分为四个表型和遗传学上不同的组，其中一些产生高效力的神经毒素。这些神经毒素引起肉毒中毒，影响人类和动物，并可能因呼吸功能衰竭导致死亡。I组和II组菌株与人类肉毒中毒相关，III组菌株与动物肉毒中毒相关。IV组菌株尚未与疾病相关联。嗜温的I组由产蛋白酶菌株组成，产生毒素类型A、B和/或F，通常来源于陆地。据报道，I组菌株的生长温度在12°C至48°C之间。
II组菌株是嗜冷的且非蛋白水解的，产生毒素类型B、E或F，常见于水生环境。据报道，II组孢子在低至3°C或高至45°C的温度下也能生长。Jensen等人测定了九株II组菌株的细胞或孢子在各种温度下的生长概率，并发现菌株在极端温度下的生长潜力存在差异。关于多个II组肉毒梭菌菌株的最低和最高生长温度以及在不同温度下的生长速率的变化情况尚不清楚，II组菌株的遗传背景如何反映在其极端温度生长能力上也不得而知。I组菌株具有高度相似的脉冲场凝胶电泳图谱，可能形成一个遗传狭窄的群体。在I组菌株中观察到最低和最高生长温度的差异分别高达3.7°C和7.1°C，并且在42°C时的生长速率差异高达30倍。对于遗传上比I组菌株更多样化的II组菌株，预计其生长特性的变异更大。
在经最低限度加工的冷藏食品中，如真空包装熏鱼和肉制品中的II组肉毒梭菌菌株，曾引起肉毒中毒。由于即食食品工业加工过程中使用的温度通常过低而无法消除细菌孢子，并且盐和防腐剂的有限使用不足以抑制II组菌株的生长和产毒，主要的控制措施是持续冷藏。尽管现行建议要求保质期超过10天的经最低限度加工包装食品应在3°C以下储存，但零售和家庭冰箱的实际温度往往更高。因为即使是中度的温度滥用也可能导致严重后果，所以了解II组肉毒梭菌菌株生长所需温度的变化对于控制食源性肉毒中毒暴发的风险至关重要。
在本研究中，我们测定了24株II组肉毒梭菌菌株的最低和最高生长温度以及在不同温度下的生长速率。
表1.研究中包含的II组肉毒梭菌菌株
| 毒素类型 | 菌株 | 来源 | 来源机构 |
|---|---|---|---|
| B | Eklund 17(Eklund 17, ATCC 25765) | 海洋沉积物 | ATCC |
| B | BL 93/6(CDC 5900) | 人类 | IFR |
| B | BL 90/4(Prevot 59) | 无数据 | ATCC |
| E | K3 | 虹鳟鱼表面 | DFHEH |
| E | K8 | 虹鳟鱼肠道 | DFHEH |
| E | K35 | 白鲑 | DFHEH |
| E | K36 | 虹鳟鱼 | DFHEH |
| E | K42 | 虹鳟鱼肠道 | DFHEH |
| E | K44 | 虹鳟鱼肠道 | DFHEH |
| E | K51 | 虹鳟鱼表面 | DFHEH |
| E | K101 | 圆鳍雅罗鱼表面 | DFHEH |
| E | K117 | 白鱼 | DFHEH |
| E | K119 | 虹鳟鱼肠道 | DFHEH |
| E | K125 | 虹鳟鱼卵 | DFHEH |
| E | BL 93/8(CDC 8073) | 人类 | IFR |
| E | 31-2570 | 无数据 | DFHEH |
| E | BL 81/26(Beluga) | 白鲸鳍肢 | IFR |
| E | S16 | 鱼塘沉积物 | DFHEH |
| E | CB11/1-1 | 白鱼卵 | DFHEH |
| F | 202(ATCC 23387) | 海洋沉积物 | ATCC |
| F | BL 86/32(Colworth 47) | 无数据 | IFR |
| F | BL 86/33(Colworth 187) | 无数据 | IFR |
| F | BL 86/34(Colworth 195) | 无数据 | IFR |
| F | 610B8-6 | 鲑鱼 | Craig, Lindroth |
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