摘 要：文章通过构建进化树研究食窦魏斯氏菌W. cibaria BWL4 的种属亲缘性，利用生长曲线分析W. cibaria BWL4作为乳酸菌的生物学共性，通过体外实验探讨其耐酸、耐胆盐以及抑菌谱特性。研究发现：W. cibaria BWL4 具有较好的产酸性能和耐酸、耐胆盐的特性；其菌液对黄曲霉菌、灰霉菌和扩展青霉菌均有不同程度的抑制作用；W. cibaria BWL4的细胞上清液对大肠杆菌、单核细胞增生李斯特菌、丙二酸盐克罗诺362、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌均有明显的抑制效果。该结果为进一步研究W. cibaria BWL4在乳制品中的应用奠定了基础。
乳酸菌(Lactic acid bacteria, LAB)是一类以碳水化合物为原料，代谢产生大量乳酸的兼性厌氧细菌。乳酸菌可以调节食物口感、改善风味，同时作为肠道菌群的一部分，可以保持胃肠道微生态平衡，促进胃肠道对营养物质的吸收，对提高消化率起着至关重要的作用。从发酵食品中分离出的乳酸菌是一种更加安全、更可靠的天然生物防腐剂，它产生的一些诸如有机酸、脂肪酸、过氧化氢、肽类等具有抗菌活性的物质在抑制食品中的真菌毒素方面具有巨大的潜力，从而发挥了LAB对食品保存和安全的作用。LAB因能够产生乳酸、乙醇、细菌素、胞外多糖等多种高价值的代谢物而被广泛应用于食品与工业领域。
魏斯氏菌(Weissella)是乳酸菌成员之一，为革兰氏阳性、过氧化酶阴性、无芽孢形成的杆状菌株。目前被分离和鉴定出的魏斯氏菌有25种，多数魏斯氏菌生长温度为28~37℃，最适pH值为4.0~9.5。研究表明，魏斯氏菌可以发酵产生细菌素、胞外多糖、有机酸、双乙酰等抑菌物质，因此，在食品与医药行业中具有广阔的发展前景。
食窦魏斯氏菌(W. cibaria)首次被发现于泰国发酵食品中。从奶酪中分离的W. cibaria CH2菌株具有良好的耐酸、耐盐、聚集能力以及较强的耐药性和抑菌活性。W. cibaria JW15和W. cibaria CMS1都具有较强的抗氧化作用，能够改善由致病菌或氧化应激引起的疾病。本文通过研究W. cibaria BWL4的生物学特性，发现其不仅具有良好的耐酸、耐胆盐性能，还对各种病原真菌有明显的抑制作用，是一株有潜力的益生菌。因此，本文推测W. cibaria BWL4可能产生一些诸如细菌素、胞外多糖等代谢物来抑制致病菌，为深入研究W. cibaria BWL4的抑菌机理奠定了基础。
1 材料与方法
1.1 材料及仪器
1.1.1 菌株与载体
黄曲霉菌株(Aspergillus flavus JXZS-117-1)由中国农业科学院油作物研究所惠赠；灰霉菌株(Botrytis cinerea FJH5)由中国农业大学种子健康中心惠赠；扩展青霉菌株(Penicillium ecpansum)由以色列农业部研究组提供；镰刀菌株(Fusarium spp.)、W. cibaria BWL4由本实验室分离纯化所得；金黄色葡萄球菌、大肠杆菌菌株、单核细胞增生李斯特菌、沙门氏菌以及丙二酸盐克罗诺362均冷藏于本实验室-80℃冰箱。
1.1.2 试剂及试剂盒
盐酸购于国药集团化学试剂有限公司；牛胆盐购于上海麦克林生化科技有限公司；琼脂粉购于北京索莱宝科技有限公司；LB肉汤购于青岛海博生物技术有限公司；MRS肉汤、革兰氏染色试剂盒均购于广东环凯微生物科技有限公司。
1.1.3 仪器设备
所用仪器设备有：，立式压力蒸汽灭菌器(上海三申医疗器械有限公司)，pH计(上海仪电科学仪器股份有限公司)，小型冷冻离心机(长沙湘智离心机仪器有限公司)，紫外分光光度计(济南飞赛电子科技有限公司)，立式智能精密摇床(上海博迅医疗生物仪器股份有限公司)，全自动生长曲线分析仪(Bioscreen)。
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