1.3.6芍药苷对鲍曼不动杆菌生物大分子外渗的影响
每孔加入200μL浓度为1×106 CFU/mL的鲍曼不动杆菌菌液到24孔板中，再加入200μL浓度为1/4×MIC、1/2×MIC、1×MIC、2×MIC芍药苷的肉汤培养液，37℃培养16 h。培养结束后，取出300μL待测样品，于4℃、2000×g离心15 min，取出上清液100μL加入96孔板中，于260 nm处测定吸光度值。以不含芍药苷的肉汤培养基作为对照。
1.3.7芍药苷对鲍曼不动杆菌生物被膜形成能力的影响
每孔加入100μL浓度为1×106 CFU/mL的鲍曼不动杆菌菌液到96孔板中，再加入100μL浓度为1/4×MIC、1/2×MIC、1×MIC、2×MIC芍药苷的肉汤培养液，37℃培养16 h。PBS缓冲液洗涤96孔板管壁上未黏附的菌体，再用200μL的PBS重悬菌体。加入200μL甲醇固定20 min，采用200μL浓度为2%的结晶紫染色液对生物被膜染色20 min。加入200μL浓度为33%的冰醋酸进行细胞脱色，于630 nm处测定吸光度值。不含芍药苷的肉汤培养基作为对照。
1.4统计学方法
采用SPSS 22.0软件对各组数据进行统计学分析。符合正态性、独立性以及方差齐性的计量资料采用均数±标准差表示，组间比较采用独立样本t检验，多组比较采用单因素方差分析（ANOVA）。t检验为双尾、校正多重比较。检验水准α=0.05。
2.结果
2.1病原菌分布情况
2023年1月至2024年12月期间，我院呼吸科患者标本共分离获得2606株病原菌，其中革兰阳性菌417株（16.02%），革兰阴性细菌1646株（63.15%），真菌543株（20.83%）。革兰阳性菌中检出率排名前五位的细菌为金黄色葡萄球菌（4.64%）、乙型溶血性链球菌（4.34%）、屎肠球菌（2.49%）、头状葡萄球菌（2.42%）、纹带棒杆菌（2.11%）；革兰阴性细菌中检出率排名前五位的细菌为鲍曼不动杆菌（18.38%）、肺炎克雷伯菌（13.62%）、大肠埃希菌（9.02%）、铜绿假单胞菌（8.33%）、嗜麦芽窄食单胞菌（4.30%）；真菌检出率排名前五位的是热带假丝酵母（5.87%）、白假丝酵母（4.76%）、季也蒙假丝酵母（2.49%）、光滑假丝酵母（2.11%）、葡萄牙假丝酵母（1.61%）。见表1。
表1呼吸科患者标本病原菌分布情况
2.2主要革兰阴性细菌耐药情况
如表2所示，鲍曼不动杆菌对阿米卡星、氨苄西林、亚胺培南、美罗培南、庆大霉素等抗生素表现出耐药，耐药率超过95.00%；肺炎克雷伯菌对头孢唑啉、氨苄西林和环丙沙星耐药率超过了50.00%；大肠埃希菌对亚胺培南、美罗培南、左氧氟沙星、环丙沙星、氨曲南和替卡西林等抗生素表现出耐药，耐药率超过50.00%。
表2呼吸科主要革兰阴性细菌对不同抗生素的耐药情况
2.3芍药苷对鲍曼不动杆菌23091779生长的影响
如表3所示，从我院呼吸科分离获得的编号为23091779的鲍曼不动杆菌对头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林/克拉维酸、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、美罗培南等抗生素均表现出耐药。浓度为50 mg/mL的芍药苷对鲍曼不动杆菌23091779的抑菌圈直径为（27.14±0.36）mm。根据《M100抗微生物药物灵敏度试验执行标准》判定鲍曼不动杆菌23091779对芍药苷的灵敏度为极敏。如图1所示，芍药苷对鲍曼不动杆菌的MIC和MBC分别为75μg/mL和150μg/mL，且与鲍曼不动杆菌浓度无关。如图2所示，与阴性对照组相比，芍药苷与鲍曼不动杆菌23091779共培养能够抑制菌体的生长，且随着芍药苷浓度的升高，鲍曼不动杆菌23091779生长受到的抑制越大。
表3鲍曼不动杆菌23091779的抗生素敏感性测定
图1芍药苷对鲍曼不动杆菌的MIC和MBC
注：ns表示P＞0.05。
图2不同浓度芍药苷对鲍曼不动杆菌23091779生长曲线的影响
注：NC为阴性对照。
2.4芍药苷对鲍曼不动杆菌23091779生物被膜形成的影响
不同浓度的芍药苷干预16 h后的鲍曼不动杆菌23091779生物被膜形成情况如表4所示。阴性对照鲍曼不动杆菌2309177生物被膜A值为0.4423±0.2120。随着芍药苷浓度的升高，鲍曼不动杆菌2309177生物被膜A值显著降低。当芍药苷浓度为1/4×MIC时，鲍曼不动杆菌23091779生物被膜A值降至为0.3712±0.1921（t=4.635，P=0.042）。
表4芍药苷对鲍曼不动杆菌23091779生物被膜形成的影响
2.5芍药苷对鲍曼不动杆菌23091779生物大分子外渗的影响
如图3所示，与阴性对照组相比，随着芍药苷浓度的升高；当芍药苷浓度≥1/4×MIC时，鲍曼不动杆菌2309177生物大分子外渗显著升高（t=6.736，P＜0.001）。
图3不同浓度芍药苷对鲍曼不动杆菌23091779生物大分子外渗的影响
注：NC为阴性对照，a为与NC比较，P＜0.05。
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